Les Brèves :
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PCR / bas de page

Spécial OGM    (juillet 2000)

A l'heure où le débat sur les Organismes Génétiquement Modifiés a pris une dimension passionnelle, le Larebron fait le point sur cette question : législation, produits concernés, techniques de détection … afin que chacun, industriel, distributeur, ou consommateur dispose des éléments pour effectuer ses choix en toute sécurité et en conformité avec la réglementation.

Dr A. Exinger


OGM : 3 règlements européens

Trois règlements européens légifèrent l'utilisation et l'étiquetage des OGM à cette date :


OGM : de nombreux produits concernés

A ce jour, la réglementation française autorise la commercialisation de certains maïs et soja transgéniques.

Afin de répondre aux attentes des consommateurs et aux exigences de la réglementation, leur détection est effectuée par l'analyse des matières brutes et des produits transformés.

Exemples : ingrédients, arômes, additifs, auxiliaires technologiques tels que amidons, lécithines, concentrés de protéines végétales, huiles végétales, sirops de glucose, dextrines, gluten, semoules et farines, enzymes.


OGM : normalisation analytique européenne en cours …

Le Larebron participe à l'élaboration des normes au sein de la commission AFNOR ''Détection et quantification des OGM et des produits dérivés''.

L'objectif est d'assurer l'harmonisation des méthodes d'analyse par le respect des principes généraux décrits : échantillonnage, extraction de l'ADN, détection et quantification par PCR. Une première étape est déjà réalisée avec la parution de la norme

Un moyen sûr d'être averti au plus vite des avancées et de l'aboutissement des travaux de recherche !


OGM : techniques analytiques développées au Larebron

Les techniques analytiques développées au Larebron utilisent la PCR (Polymerase Chain Reaction).

Le patrimoine génétique d'un OGM comporte un ou plusieurs gènes extérieurs (transgène) issus d'espèces du règne animal, végétal ou microbien.

La PCR consiste à multiplier, si elle existe, une séquence d'ADN caractéristique de l'OGM, permettant ainsi la détection puis l'identification et la quantification de cet OGM.

Chaque protocole est adapté aux produits analysés et aux séquences d'ADN recherchées.


OGM : Informations pratiques

Analyses :

Le Larebron propose des analyses de type qualitatives et quantitatives (dans le cas d'un échantillon positif).

Les délais d'analyse sont compris entre 5 et 10jours ouvrés.

Quantités d'échantillons nécessaires à l'analyse :

Nature des produits

Quantité nécessaire

produits en grains

10 000 graines ou 3 kg maximum

produits solides
(farines, semoules, tourteaux, …)

1 kg

produits liquides

1000 ml ou 1 kg

produits pâteux ou visqueux

500 ml ou 500 g

produits finis (conditionnés)

100 g ou emballages individuels

Toute notre équipe se tient à votre disposition pour vous renseigner sur les analyses d'OGM.

N'hésitez pas à contacter

D.Gauckler, attaché commercial ,
par téléphone (03 88 65 37 39) ou fax (03 88 65 37 40) ou email.


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Spécial PCR    (février 2000)

Soucieux de répondre au mieux aux besoins des professionnels de l'agroalimentaire, le Larebron a mis le cap depuis 1996 sur les techniques de biologie moléculaire, en participant à l'élaboration et à la validation AFNOR des méthodes par PCR avec Sanofi Diagnostics Pasteur. Ces méthodes constituent un véritable progrès pour la gestion des risques sanitaires en agroalimentaire. En effet, à la différence des techniques utilisées jusqu'alors, elles permettent d'obtenir 1 à 2 jours après mise en analyse, des résultats définitifs plus spécifiques. Ces délais très courts permettent une meilleure gestion de la libération des lots et par conséquent une diminution des risques sanitaires et économiques encourus par les acteurs de la filière.

De ce fait, les techniques PCR permettent de valoriser l'image de qualité des produits issus des industries agroalimentaires et du terroir.

Dr A. Exinger


PCR et microbiologie : historique

La détection des Listeria monocytogenes et Salmonella peut être réalisée par plusieurs méthodes dont :

¨ Les méthodes AFNOR de référence (NF V 08-055 et NF V 08-052), qui font appel aux techniques de microbiologie classiques : enrichissement , isolement sur milieu de culture spécifique, puis confirmation.

¨ La méthode de détection de l'ADN par PCR-Probelia, procédé innovant mis au point par BIORAD (ex - Sanofi Diagnostics Pasteur). Cette méthode est basée sur la détection du matériel génétique spécifique d'une bactérie, et offre donc les plus grandes garanties en terme de fiabilité. Elle a été appliquée dès 1996 par le Larebron, laboratoire de référence pour la validation AFNOR de cette méthode. A l'heure actuelle, plus de 200 000 analyses par an sont réalisées dans toute l'Europe grâce aux méthodes PCR-Probelia.


PCR et autorités sanitaires :

La détection des Listeria monocytogenes et Salmonella par PCR répond bien aux exigences de rapidité et de fiabilité indispensables pour les contrôles officiels. C'est pourquoi les autorités sanitaires (DSV, AFSSA) utilisent cette méthode validée par l'AFNOR pour la détection des pathogènes.


PCR : Principe

La détection des bactéries pathogènes par PCR fait appel à une technologie qui peut être résumée en quelques étapes (exemple de Listeria monocytogenes) :

1. Enrichissement : les bactéries vivantes présentes dans le produit se multiplient.

2. Extraction de l'ADN : le matériel génétique des bactéries présentes est isolé.

3. Amplification : Le gène spécifique de Listeria monocytogenes, s'il est présent, est amplifié en plus d'un million de copies.

4. Détection du gène amplifié : le gène amplifié est détecté grâce à une sonde spécifique : seul le gène de Listeria monocytogenes sera détecté, sans confusion possible avec d'autres bactéries ni même d'autres Listeria.

5. Interprétation : si le gène est détecté, il y a présence de Listeria monocytogenes dans le produit. Chaque test fait l'objet de plusieurs contrôles permettant de vérifier que :

¨ La réaction d'amplification de l'ADN a bien eu lieu : absence de faux négatifs

¨ Les réactifs et le matériel utilisés n'ont pas été contaminés par de l'ADN ne provenant pas de l'échantillon : absence de faux positifs.


PCR et Bactéries mortes :

Tout au long du processus d'analyse, des étapes empêchent la détection de fragments d'ADN de bactéries mortes qui pourraient être présentes dans le produit :

La première étape de l'analyse consiste en un enrichissement : phase durant laquelle les bactéries éventuellement présentes sont placées dans des conditions idéales pour se multiplier.

Or, une bactérie morte ne se multiplie plus. C'est pourquoi seules les bactéries vivantes en concentration suffisante après enrichissement sont détectables.

Lors de la validation AFNOR de la méthode, ceci a été vérifié par les travaux du CNEVA (AFSSA depuis 1999).


PCR et reconnaissances officielles

La recherche de Salmonella et Listeria monocytogenes par PCR-Probelia est validée par l'AFNOR (N° SDP 07/2-06/96 et SDP 07/3-01/98). Cela signifie que 98 % des résultats issus de ces méthodes sont identiques à ceux obtenus par les méthodes AFNOR de référence.

De plus, le Larebron est l'un des deux laboratoires français accrédité par le COFRAC pour ces méthodes. Chaque échantillon est analysé selon des procédures très strictes garantissant une extrême fiabilité du résultat.


PCR : Autres applications

Les techniques PCR sont également utilisées au Larebron pour :


Informations complémentaires

Toute notre équipe se tient à votre disposition pour vous renseigner sur les analyses par PCR ou sur tout autre sujet.
N'hésitez pas à contacter le 03 88 65 37 39 ou email.

Agnès Wasilewski, responsable du Service de Microbiologie

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